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    利用壓力循環(huán)技術(shù)從土壤中提取病原DNA(PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備)

      更新時(shí)間:2009-06-04 點(diǎn)擊量:1374

    領(lǐng)域:分子診斷用于植物病理學(xué) 關(guān)鍵詞:PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備 細胞破碎

     
    在低密度病原及一些較難提取樣品中,檢測及定量分析絲核菌、腐霉菌及其它通過(guò)土壤傳播的病原體時(shí),盡管利用的是快速診斷裝置如實(shí)時(shí)定量PCR,但結果極其不穩定。原因在于,樣品制備在生物樣品制備過(guò)程中一直是一個(gè)瓶頸。一些特殊的DNA,RNA及小分子采用傳統的方法無(wú)法有效地提取出來(lái)。目前,哈佛的科學(xué)家們發(fā)明了種全新的儀器:PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統,可以有效地解決這個(gè)問(wèn)題。該系統的優(yōu)點(diǎn)在于:重現性好,效率高,快速,安全,平行性好。
     
    這套系統中,樣品在特定條件下被置于流體靜壓循環(huán)中(從周界壓力到35000psi),以此來(lái)提高從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的提取率。 這項全新的技術(shù)——壓力循環(huán)技術(shù)(PCTPRESSURE CYCLING TECHNOLOGY),與其它方法相比,可以將從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的效率提高2-30倍。 利用PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統,我們從小麥根部獲得可檢測的絲核菌DNA,這種小麥根部很難進(jìn)行均質(zhì)。在80%這樣的根部樣品中,必須要提取出足夠量的病原DNA,才可以用實(shí)時(shí)PCR進(jìn)行定量分析。而且,由于PCT SPS是一個(gè)封閉系統, 樣品不會(huì )受到采用研磨方法時(shí)污染。PCT SPS在種質(zhì)篩選、食品究全評估、宿主細胞和微菌核酸分別描述方面有著(zhù)重要的作用和*的優(yōu)勢。
     

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