研究幾種酸純化的具體方法

更新時(shí)間：2017-06-19 點(diǎn)擊次數：1935

　　今天來(lái)介紹幾種酸純化的具體方法，以核酸為例，核酸抽提與純化是分子生物學(xué)試驗的基礎，核酸純化方法是影響提取核酸質(zhì)量高低的zui重要因素，也是下游分子生物學(xué)試驗成敗的關(guān)鍵。
　　1.PC抽提法
　　PC抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段，但超過(guò)了該飽和度，裂解體系中的蛋白質(zhì)不會(huì )被一次去除，必須靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都會(huì )損失部分核酸。另外，體系太粘稠的壞處是，蛋白質(zhì)難以*去除，以及基因組DNA會(huì )斷裂得更厲害，所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個(gè)用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特點(diǎn)，在RNA抽提時(shí)獲得DNA殘留極少的RNA。不過(guò)有一點(diǎn)要提醒的是，某些植物樣品，在去除某些雜質(zhì)之前，是不能使用PC抽提的，否則核酸必定降解。PC抽提zui大的優(yōu)勢是成本低廉，對實(shí)驗條件要求較低，對于經(jīng)費緊張的實(shí)驗室較為實(shí)用。
　　2.離心柱法
　　離心柱酸純化法，是目前試劑盒提取廣泛應用的方法。其zui大特點(diǎn)是受人為操作因素影響小，純度的穩定性很高(雖然純度不一定比PC純化方法更高)。加入的液體通過(guò)離心后會(huì )進(jìn)入另外一個(gè)離心管中，與含有核酸的柱子*是分開(kāi)的，所以洗滌更*。其致命弱點(diǎn)是樣品過(guò)量，提取效率較低，且需要反復離心，操作復雜，成本也較高。
　　3.生物磁珠法
　　生物磁珠法是將純化介質(zhì)包被在納米級生物磁珠表面，通過(guò)介質(zhì)對核酸的吸附，在外加磁場(chǎng)下使核酸附著(zhù)于磁珠定向移動(dòng)，從而達到固液分離純化的作用。

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